Будьте завжди в курсі!
Дізнавайтесь про новітні розробки першими
Новини
Всі новини
26 Січня 2021
Нові компактні об’єктиви M117FM-RG від Tamron
20 Жовтня 2020
21 жовтня ДЕНЬ ФОТОНІКИ
25 Вересня 2020
Імунохроматографічний зчитувач Hamamatsu
Проста фізика: Спектри поглинання, збудження та емісії
10.02.2020
Що таке спектри поглинання, збудження та емісії?
У цій статті пояснюються відмінності між спектрами молекулярного поглинання, збудження та емісії
Спектр поглинання
Спектр поглинання (також відомий як спектр в УФ та видимій частинах спектру (спектр UV-Vis), спектр абсорбції та електронний спектр) показує зміну поглинання зразка як функції довжини хвилі падаючого світла (мал. 1) і вимірюється за допомогою спектрофотометра. Спектр поглинання вимірюється шляхом зміни довжини хвилі падаючого на зразок світла за допомогою монохроматора та запису інтенсивності світла, що потрапляє при цьому на детектор. Інтенсивність світла, що пропускається через зразок речовини, ISample (таких як аналіт розчинений у розчиннику) та інтенсивність світла через порожній зразок, IBlank, (лише розчинник) реєструються, а поглинання зразка розраховується за допомогою формули:
Поглинання лінійно пропорційне молярній концентрації зразка; це дозволяє обчислити концентрацію зразка зі спектру поглинання за допомогою закону Бера-Ламберта.
Малюнок 2: Схема вимірювання спектру поглинання у спектрофотометрі.
Спектр збудження
Малюнок 3: Спектр збудження флуоресценції антрацену в циклогексані, виміряний за допомогою спектрофлуориметра FS5. Параметри експерименту: λem = 420 нм, Δλem = 1 нм, Δλex = 1 нм.
Джерело: edinst.com/blog
У цій статті пояснюються відмінності між спектрами молекулярного поглинання, збудження та емісії
Малюнок 1: Спектр поглинання антрацену в циклогексані, виміряний за допомогою спектрофлуориметра FS5. Параметри експерименту: Δλ = 1 нм.
Спектр поглинання
Спектр поглинання (також відомий як спектр в УФ та видимій частинах спектру (спектр UV-Vis), спектр абсорбції та електронний спектр) показує зміну поглинання зразка як функції довжини хвилі падаючого світла (мал. 1) і вимірюється за допомогою спектрофотометра. Спектр поглинання вимірюється шляхом зміни довжини хвилі падаючого на зразок світла за допомогою монохроматора та запису інтенсивності світла, що потрапляє при цьому на детектор. Інтенсивність світла, що пропускається через зразок речовини, ISample (таких як аналіт розчинений у розчиннику) та інтенсивність світла через порожній зразок, IBlank, (лише розчинник) реєструються, а поглинання зразка розраховується за допомогою формули:
Поглинання лінійно пропорційне молярній концентрації зразка; це дозволяє обчислити концентрацію зразка зі спектру поглинання за допомогою закону Бера-Ламберта.
Малюнок 2: Схема вимірювання спектру поглинання у спектрофотометрі.
Спектр збудження
Малюнок 3: Спектр збудження флуоресценції антрацену в циклогексані, виміряний за допомогою спектрофлуориметра FS5. Параметри експерименту: λem = 420 нм, Δλem = 1 нм, Δλex = 1 нм.
Спектр збудження флуоресценції показує зміну інтенсивності флуоресценції як функції довжини хвилі світла збудження (мал. 3) та вимірюються за допомогою спектрофлуориметра. Довжина хвилі монохроматора емісійного випромінювання встановлюється на відому для зразка довжину хвилі флуоресценції, а довжина хвилі монохроматора збудження сканується у потрібному діапазоні збудження і інтенсивність флуоресценції, як функція довжини хвилі збудження, вимірюється детектором. Якщо зразок підкоряється правилу Каші та закону Вавилова, тоді спектр збудження та спектр поглинання будуть однаковими (порівняйте малюнки 1 та 3). Отже, спектр збудження можна розглядати як спектр поглинання, виявлений флуоресценцією.
Малюнок 4: Схема вимірювання спектру збудження у спектрофлуориметрі.
Спектр випромінювання (спектр емісії)
Малюнок 5: Спектр випромінювання флуоресценції (спектр емісії флуоресценції) антрацену в циклогексані, виміряний за допомогою спектрофлуорометра FS5. Експериментальні параметри: λex = 340 нм, Δλex = 1nm, Δλem = 1 нм
Спектр випромінювання флуоресценції (спектр емісії флуоресценції або просто спектр флуоресценції) показує зміну інтенсивності флуоресценції як функції довжини хвилі випромінювання (мал. 5) і вимірюється за допомогою спектрофлуориметра. Довжина хвилі монохроматора збуджуючого випромінювання встановлюється на відому для зразка довжину хвилі поглинання, а довжина хвилі монохроматора емісійного випромінювання сканується у потрібному діапазоні випромінювання та інтенсивність флуоресценції, як функція довжини хвилі випромінювання, вимірюється детектором.
Малюнок 6: Схема вимірювання спектру емісії у спектрофлуориметрі.
Джерело: edinst.com/blog
